安捷伦Seahorse XF细胞能量代谢表型测试实验结果解析

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细胞通过综合线粒体呼吸和糖酵解来满足能量和生物合成的需求,对这两条代谢通路间平衡的测量和评估将能够提供任何单一指标都无法提供的信息。通过同时测定细胞在基础和应激状态下对这两条主要能量通路的相对利用率,可快速得知基因变化导致的功能效应。安捷伦Seahorse XF细胞能量代谢表型测试提供确定基础表型、应激表型和代谢潜能的标准方法,这些代谢功能的关键参数揭示了细胞的能量代谢表型。

 

实验简介:

Seahorse XF细胞能量表型测试通过一次性注射OligomycinFCCP这两种通路调节因子,同时测量线粒体呼吸和糖酵解潜能。

OligomycinATP合酶的抑制剂可抑制线粒体ATP产生,从而将能量产生转移至糖酵解通路,引起ECAR进一步升高,反映了细胞最大的糖酵解能力;

FCCP:是一种解偶联剂,加入该药会破坏质子梯度和线粒体膜电位,通过ETC的电子流不受限制,复合物IV耗氧量达到大,从而获得线粒体有氧呼吸最大值。

实验结果意义:

基础表型:细胞在起始条件(底物充足情况)下线粒体呼吸和糖酵解的相对利用率;

应激表型:细胞在应激(诱导能量需求)条件下线粒体呼吸和糖酵解的相对利用率;

代谢潜能:细胞通过线粒体呼吸和糖酵解满足自身能量需求的能力。

实验结果计算公式:

该实验通过一次通路调节因子加药,即可同时测量线粒体呼吸和糖酵解潜能。快速测定细胞能量代谢表型,揭示其代谢潜能,提供细胞能量代谢的概况,为活细胞能量代谢表型的测定提供了一种简单的检测方法。

声明:仅供研究使用,不用于诊断性操作。

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2022年4月21日 15:29
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